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1.溶解氧 由于测试温度设定在 20°C，冬季采集的样品溶解氧过饱和，夏季采集的样品可能在 20°C 时溶解氧欠饱和。 这些样品应在 BOD5 测定之前进行搅拌和曝气，以将溶解氧调节到 20°C 饱和点附近。 2.PH 试验水样的pH值应调节至6.7～7.5（最佳点为pH 7.2）。BOD5读数的下降可能是由于被测样品的pH值超过了这个范围。对于含有大量酸或碱的样品，BOD5 读数可能会低于实际含量。 酸性或碱性水样应用适当浓度的 NaOH 或 H2SO4 中和。 如果工业废水含有酸或盐的氧化物，或需要高倍稀释，对于标准的五天 BOD5 测定，可以使用pH7.2的磷酸缓冲液作为稀释剂。 3.温度 实验过程中将搅拌器置于20℃±1℃的培养箱中。BOD的测定也可以超过这个温度范围。 例如，在 35℃或 37℃ 时，测量 BOD 所需的时间可分别缩短至 2.5 天或 34 小时，测量结果与 20℃ 5 天相似。升高温度得到的BOD值与5天在20℃下测得的结果有很好的相关性。 如果取样时样品温度超过20℃，或样品温度低于20℃，可将样品置于恒温箱中恒温。 样品需要在样品测量之前进行处理。 4. BOD5的稀释 仪器的测量范围为0～1000mg/L。如果测试样品的 BOD5 估算值高于 1000mg/L，可用稀释水稀释样品。加入的稀释水也应保持在20℃，并应使用曝气使氧气饱和。如果需要测试几个相同的样品，应将足够量的原始水样稀释，并从稀释后的样品中取出与测量范围相对应的体积。例如，原水样稀释两倍时，稀释倍数为2；原水样按1:10稀释时，稀释倍数为10。 5、BOD5的接种 什么是接种 BOD5实验要求水样含有供生物氧化的有机物和适量的氧化有机物的需氧细菌，以及吞食有机物和增进需氧细菌生长的其他微生物。如果水样中根本没有或几乎没有这类微生物，就必须对水样按一定比例加入这类微生物溶液。这个过程应称之为接种。 与生活污水不同，工业废水可能不含有足够量的细菌以供样品中所含有机物完全的生化分解，如果所测定的样品就是这种废水，应加入接种溶液。 6、BOD5的接种方法 制备接种溶液 用于接种的溶液为20℃放置24～36小时的未经处理新鲜生活污水的上清液。 在接下来的实验中，如果要使用之前测量的水样作为接种液，则应通过滤纸过滤。该滤液应冷藏（约 20℃）并避光保存。一般两个月内可能是有效的。 将待测样品放入培养瓶中，用吸管向样品中加入2～5滴接种液（视样品量而定）。按照步骤测量BOD5，五天后得到的读数可作为测试样品的真实BOD5值。 注意：使用上述方法接种时。没有必要校正接种的 BOD5 读数。由于加入的接种量相对于水样量来说太少，不会影响BOD5读数。如果上述方法不能诱导水样中有机物的生物降解，可以增加接种量。如果 BOD5 测定仪的读数受到接种液添加的影响，可以同时测试接种液和样品，进行平行样品测定。 接种量常取1％，5％，10％三种。
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