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一般BOD5（五日生化需氧量）常用的是稀释法，选择原样品或经适当稀释的样品进行测定，然后用适当的倍数进行稀释，使培养瓶中有足够的溶解氧以满足五日生化的需氧要求。将满足上述条件的样品分成两份，一份测定当天的溶解氧质量浓度，另一份放入20摄氏度的培养箱内，培养5天后再检测溶解氧的质量浓度，这两种样品的差就是五日生化需氧量，即BOD5。 对于某些污染严重的地面水及大多数工业废水、生活污水，因含较多的有机物，需要稀释后再培养测定，以降低其浓度，保证生物降解过程在有足够溶解氧的条件下进行。BOD5具体水样稀释倍数可借助于高锰酸钾指数或化学需氧量（COD）推算。 稀释法检测水中BOD5的步骤： 1、稀释水的检验 用虹吸法吸取稀释水（或接种稀释水），注满两个溶解氧瓶，加塞，用水封口。其中一瓶立即测定其溶解氧，另一瓶置于恒温生物培养箱内，在（20±1）℃培养5d后测定BOD5含量，要求溶解氧的减少量小于0.2~0.5mg/L。 2、稀释倍数的确定 地面水可由测得的高锰酸盐指数乘以适当的系数求出稀释倍数。 水质BOD5测定的注意事项： 1、对于生化处理后的水中常含有硝化细菌，干扰BOD的测定，可加入硝化抑制剂，如丙烯基硫脲C4H3N2S或用酸处理消除干扰。 2、在两个或三个稀释比的样品中，凡消耗溶解氧大于2mg/L和剩余溶解氧大于1mg/L都有效，计算结果时，应取平均值。 3、培养过程中应经常检查培养瓶封口的水，及时补充，避免干涸。
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