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BOD5测定原理 稀释接种法是生化需氧量的标准方法，又称五日培养法。即取一定量原水样或稀释水样，使其完全充满密闭培养容器（也就是溶解氧瓶），在20℃±1℃暗处恒温连续培养五天五夜（5d±4h），测量培养前后水样的溶解氧浓度，两者之差称为五天生化需氧量 ，单位以氧的毫克/升。 水中微生物可降解有机物浓度越高，水中溶解氧消耗越多，BOD值也越高，水质越差。因此，BOD5是一种综合性的水质指标，间接指示水体中有机物的污染程度，衡量废水生化处理过程中的净化效率。它所反映的生物降解性是其他参数无法替代的。 但是，污（废）水中的各种可生物降解的有机物被微生物完全氧化分解需要很长时间。例如，在20℃培养条件下完成这一过程大约需要100天。为了缩短检测时间，目前国内外普遍采用BOD5用于近似表征微生物将水和废水中的有机物完全氧化分解所消耗的溶解氧。BOD5实测值约为终极生化需氧量的70%。 对溶解氧浓度高、有机物含量低的地表水，可直接取样培养测定； 对于受污染的地表水和大部分工业废水，由于含有较多的有机物，需要稀释后再培养测定，以降低有机物浓度，保证溶解氧充足； 对于一些不含或少含有微生物的工业废水，包括酸性废水、碱性废水、高温废水、冷冻保存废水以及经过氯化杀菌处理的废水等，测量前应在水样中引入能分解水中有机物的微生物。这种方法就是接种； 对于一些废水中存在难于被一般生活污水中微生物以正常速度降解有机物或含物质时，可在水样中接种驯化后的适应微生物。 BOD5分析前的准备工作 （1）分析前4小时启动恒温生化培养箱，将培养箱内温度设置为20℃，使其正常运行（必要时可用水银温度计检测培养箱内温度， 培养箱内的温度要严格控制在20±1℃)。 （2）分析前检查BOD5恒温测量室的室内温度和空调的运行情况，保持室内温度在20℃左右，以保证空调稳定正常运行（必要时可用水银温度计检测恒温测量室内温度，严格控制在20℃±1℃）。 （3）将分析用稀释水、接种液和接种稀释水敞口放入恒温生化培养箱中恒温，并在24小时内使用。 去除干扰物质 （1）如果水样中含有大量的活性或惰性大颗粒悬浮物，会干扰BOD5的测定。需要使用超声波清洗器对水样进行均质化预处理。具体方法如下： 量取适量水样，全部转移至500mL烧杯中，将烧杯放入超声波清洗槽中，开启超声波清洗器，设定作用时间为5min，利用超声波对液体空化作用。样品中可见的团块状或大颗粒状悬浮物逐渐破碎并完全溶解，说明已达到充分混合均化的程度，可量取水样进行测定。 （2）如果水样中含有藻类，BOD5 测量结果会偏高。测量前，水样应完全通过孔径1.6μm滤膜过滤器以去除藻类。 （3）如果水样中含有少量游离氯（用淀粉-碘化钾试纸检测），一般放置1h～2h即可消除干扰。对于游离氯含量高且短时间内不能消散的水样，可加入亚硫酸钠溶液，将水样中的游离氯还原去除。 （4）如果水样中含有铜、铅、锌、镉、铬、砷、氰等有毒物质，会干扰BOD5的测定，可使用含有驯化微生物的接种稀释水进行接种稀释，或增加稀释倍数以减少有毒物质浓度。
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