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1、标准溶液的制备 葡萄糖-谷氨酸标准溶液：将葡萄糖（C6H12O6）和谷氨酸（HOOC-CH2-CH2-CHNH2-COOH）在103℃干燥1小时后，各取150mg溶于稀释水，加5-10mL接种液，然后用稀释水稀释至1000mL，混匀。 2、仪器校准 取葡萄糖-谷氨酸标准溶液167mL，选择0~400mg/L量程，按BOD5检测步骤操作。检测到的BOD浓度应在180mg/L至230mg/L之间。否则需要检查接种液或实验过程是否有问题，仪器使用是否有问题。稀释水应预先保持20℃的恒温，并曝气或搅拌使溶解氧饱和。 3、注意事项 ①装瓶时水样温度为20℃左右。不要偏离太多。 ②为保证水中的溶解氧含量，应将水样鼓泡曝气1小时或置于敞口烧杯中用磁力搅拌器搅拌半小时以上，使水样的溶解氧可以饱和。 影响bod测定仪测量的因素 1、溶解氧 由于测试温度设定在20℃，冬季采集的样品会出现溶解氧过饱和，夏季采集的样品在20℃时可能会出现溶解氧欠饱和。因此，这些样品应在BOD5测定前进行搅拌和曝气，以便使溶解氧调节至约20℃的饱和点。 2、PH值 测试水样的pH值应调整为6.7～7.5（pH 7.2）。BOD5读数的下降可能是由于被测样品的pH值超出此范围。对于含有大量酸或碱的样品，BOD5读数可能低于实际含量。 酸性或碱性水样应用适当浓度的氢氧化钠溶液或稀盐酸中和。所用调节溶液的体积不应超过水样体积的0.5%。如果超过，可以增加调理液的酸碱浓度，以减少调理液的体积。 3、温度 实验时将主机放置在20℃±１℃的培养箱中。BOD的测定也能超出这一温度范围，例如，有实验证明在35℃测定BOD所需要的时间可以缩短为2.5天，其测定结果与五日20℃相似。提高温度所获得的BOD值与五日20℃条件下测定的结果有很好的相关性。 如果在采样时样品温度超过20℃，或样品温度不足20℃，可将样品放在培养箱中恒温。在样品测定前要求对样品进行处理。
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