BOD（Biochemical Oxygen Demand的缩写）：生化需氧量或生化耗氧量（一般指五天生化需氧量），是衡量水中有机物等需氧污染物含量的综合指标。说明当水中的有机物由于微生物的生化作用而被氧化分解，使之无机化或气体化时所消耗的水中溶解氧的总量。正常情况下是指将水样充满密闭的溶解氧瓶中，在20℃±1的暗处培养5天，分别测量培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD5表示。它以ppm或mg/L为单位表示。其数值越高，说明水中有机污染物越多，污染也就越严重。

为了使测试数据具有可比性，一般会规定一段时间。在此期间，用一定温度的水样培养微生物，并测定水中的溶解氧消耗量。一般以五天为周期，称为五天生化需氧量，记做BOD5。数值越大，说明水中的有机物越多，污染也就越严重。

那么生化培养就显得尤为重要，一个性能好的培养箱是BOD测定结果的保证。

1、BOD测定过程涉及的仪器

（1）恒温培养箱

（2）5——20L细口玻璃瓶。

（3）1000——2000ml量筒

（4）玻璃搅棒：棒的长度应比所用量筒高度长200mm。在棒的底端固定一个直径比量筒底小、并带有几个小孔的硬橡胶板。

（5）溶解氧瓶：250ml到300ml之间，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟型口。

（6）虹吸管，供分取水样和添加稀释水用。

2、BOD测定过程涉及的试剂

（1）磷酸盐缓冲溶液：将8.5磷酸二氢钾，21.75g磷酸氢二钾，33.4七水合磷酸氢二钠和1.7g氯化铵溶于水中，稀释至1000ml。此溶液的PH应为7.2

（2）硫酸镁溶液：将22.5g七水合硫酸镁溶于水中，稀释至1000ml。

（3）氯化钙溶液：将27.5无水氯化钙溶于水，稀释至1000ml。

（4）氯化铁溶液：将0.25g六水合氯化铁溶于水，稀释至1000ml。

（5）盐酸溶液 ：将40ml盐酸溶于水，稀释至1000ml。

（6）氢氧化钠溶液 ：将20g氢氧化钠溶于水，稀释至1000ml

（7）亚硫酸钠溶液：将1.575g亚硫酸钠溶于水，稀释至1000ml。此溶液不稳定，需每天配制。

（8）葡萄糖—谷氨酸标准溶液：将葡萄糖和谷氨酸在103摄氏度干燥1h后，各称取150ml溶于水中，转入1000ml容量瓶内并稀释至标线，混合均匀。此标准溶液临用前配制。

（9）稀释水：稀释水的PH值应为7.2，其BOD5应小于0.2ml/L。

（10）接种液：一般采用生活污水，在室温下放置一昼夜，取上清液使用。

（11）接种稀释水：分取适量接种液，加入稀释水中，混匀。每升稀释水中接种液加入量为生活污水1——10ml；或表层土壤侵出液20——30ml；接种稀释水的PH值应为7.2。BOD值以在0.3——1.0mg/L之间为宜。接种稀释水配制后应立即使用。

3、BOD测定计算

（1）不经稀释直接培养的水样

BOD5（mg/L）=C1-C2

式中：C1——水样在培养前的溶解氧浓度（mg/L）；

C2——水样经 5 天培养后，剩余溶解氧浓度（mg/L）。

（2）经稀释后培养的水样

BOD5（mg/L）=[（C1-C2）—（B1-B2）f1]∕f2

式中：C1——水样在培养前的溶解氧浓度（mg/L）；

C2——水样经 5 天培养后，剩余溶解氧浓度（mg/L）；

B1——稀释水（或接种稀释水） 在培养前的溶解氧浓度 （mg/L）；

B2——稀释水（或接种稀释水） 在培养后的溶解氧浓度 （mg/L）；

f1 —— 稀释水（或接种稀释水）在培养液中所占比例；

f2 —— 水样在培养液中所占比例。

B1——稀释水在培养前的溶解氧；

B2——稀释水在培养后的溶解氧；

f1——稀释水在培养液中所占比例；

f2——水样在培养液中所占比例。

注：f1,f2的计算：例如培养液的稀释比为3%，即3份水样，97份稀释水，则f1=0.97，f2=0.03。